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细胞破碎方法种类有哪些?
[ 2008-7-17 9:15:00 | By: alqwrhimvb ]
 

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细胞破碎方法种类有哪些?

想了解一下细胞破碎的一些情况

主要有这些把,我主要从一个网站上参考来的,不过稍微精简了一下,搂住可以去原贴去看看,绝的还不错



机械法
主要通过机械切力的作用使组织细胞破碎的方法,常用的器械有组织捣碎机、匀浆器、研钵和研磨、压榨器等。
1. 组织捣碎机
将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。一般用于动物组织、植物肉质种子、柔嫩的叶芽等,转速可高达10000rpm/M以上。由于旋转刀片的机械切力很大,制备一些较大分子如核酸则很少使用。
2. 匀浆器
先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎。此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织。

3. 研钵
多用于细菌或其他坚硬植物材料,研磨时常加入少量石英砂,玻璃粉或其他研磨剂,以提高研磨效果。
4. 细菌磨
是一种改良了的研磨器,比研钵具有更大的研磨面积,而且低部有出口。操作时先把细菌和研磨粉调成糊状,每次加入一小勺,研磨20-30秒即可将细菌细胞完全磨碎。

物理法
主要通过各种物理因素使组织细胞破碎的方法。在生化制备中常用的方法有:
1. 反复冻溶法
方法:将待破碎的细胞在-20度以下冰冻,室温融解,反复几次,由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎。
2. 急热骤冷法
将材料投入沸水中,维持85-90分钟,至水浴中急速冷却,此法可用于细菌及病毒材料。
3. 超声波处理
用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂,此法多适用于微生物材料,用大肠杆菌制备各种酶,

化学及生物化学法
1. 自溶法
在一定PH和适当的温度下,利用组织细胞内自身的酶系统将的方法。此过程需较长时间,常用少量防腐剂如甲苯、氯仿等防止细胞的污染。
2. 酶溶法
利用各种水解酶,如溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶、半纤维素酶、脂酶等,将细胞壁分解,使细胞内含物释放出来。有些细菌对溶菌酶不敏感,加入少量巯基试剂或8摩尔尿素处理后,使之转为对溶菌酶敏感而溶解。
特点:
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3. 化学渗透法
某些有机溶剂(如苯、甲苯)、抗生素、表面活性剂、金属螯合剂、变性剂等化学药品都可以改变细胞壁或膜的通透性从而使内合物有选择地渗透出来。其作用机理;化学渗透取决于化学试剂的类型以及细胞壁和膜的结构与组成。

一般是用高速离心的方法

超声破碎
高速离心
机械破碎(注射器)

一般有以下几种:
1:放入庆水中,吸胀破裂(提取DNA时用)
2:研磨(在提取叶绿素时用)
3:吞噬细胞(在证明DNA作用时用)
4:病毒(不用说你也清楚)

物理破碎法
化学破碎法
生物破碎法

静态破碎剂工艺
1、高效无声破碎剂及其制造方法
2、新型静态破碎剂
3、低温型速效无声破碎剂
4、低、负温速效破碎剂
5、水下静态破碎剂及其制造方法

参考资料:

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  • 标签:细胞破碎 
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